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雙酚A檢測液相色譜法

更新時間:2016-05-20      點擊次數(shù):5070

  雙酚A,也稱BPA,是一種廣泛應(yīng)用于塑料制造的化學(xué)物質(zhì),主要用于生產(chǎn)聚碳酸酯(PC)、環(huán)氧樹脂等多種高分子材料,被廣泛用于生產(chǎn)化工產(chǎn)品和食品相關(guān)產(chǎn)品,如嬰兒奶瓶、餐具、微波爐器皿、食品包裝容器的涂層、飲料瓶以及供水管道等。研究顯示,雙酚A是一類具有雌激素樣活性的內(nèi)分泌干擾物,可能誘發(fā)兒童性早熟或致癌。

  自2011年3月1日起,歐盟成員國禁止使用含雙酚A的塑料生產(chǎn)嬰兒奶瓶,并從6月1日起禁止進口此類塑料嬰兒奶瓶。針對雙酚A安全性問題,現(xiàn)已將雙酚A檢測液相色譜法普遍應(yīng)用。

雙酚A檢測液相色譜法實驗準(zhǔn)備:

試劑:甲醇:色譜純

   乙酸、無水乙醇:分析純

   水:超純水(符合實驗室一級用水)

   雙酚A標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):純度>99.0%

儀器:LC-10Tvp液相色譜儀

   SPD-10Tvp紫外檢測器

   手動進樣閥

   電子天平

   超聲波清洗器

   超純水機

   恒溫水浴鍋

 

雙酚A檢測液相色譜法分析條件:

 色譜柱:C18色譜柱(4.6mm×250mm,5μm)

 流動相:甲醇+水=75+25

 流速:0.7mL/min

 柱溫:30℃

 檢測波長:224nm

  進樣量:20μl


 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

  雙酚A標(biāo)準(zhǔn)儲備液:稱取適量的雙酚A標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),用甲醇稀釋,配置成濃度為1000μg/ml的雙酚A儲備液。

  雙酚A標(biāo)準(zhǔn)供試液:使用時用3%乙酸溶液稀釋成濃度為1.0μg/ml的溶液. 

樣品前處理

  稱取5g的樣品,將其剪成5×5mm的小碎片,置于250ml的三角燒瓶中,加入100mL的甲醇,50℃下超聲提取2小時,過濾至250mL雞心瓶,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干,用5mL水漩渦洗脫,待凈化。

樣品濃縮和凈化

E固相萃取小柱

活化、平衡:10 mL甲醇,10 mL水依次過柱;

上樣:在水到達小柱上層篩板時,加入待凈化液;

淋洗:6 mL水合10 mL 30%甲醇水溶液依次淋洗小柱,流出液棄去;

洗脫:6 mL 50%乙腈水溶液洗脫,收集洗脫液。

洗脫液50℃下氮氣至近干,1mL流動相溶解,進樣分析。

結(jié)果與討論

   由參考文獻可初步將流動相定為甲醇與超純水,從實驗結(jié)果可知:當(dāng)只針對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的測試時,使用純甲醇做流動相對雙酚A的響應(yīng)效果,在檢測樣品含量時,我們可發(fā)現(xiàn),以純甲醇作為流動相將會產(chǎn)生大量的溶劑峰,影響到樣品檢測結(jié)果,因此我們適當(dāng)?shù)奶砑右欢ū壤乃?,降低流動相的洗脫能力,以避開溶劑峰的影響。由于3%的乙酸溶劑峰較大,因此將甲醇:水=75:25的流動相作為*流動相,其中可根據(jù)不同樣品的性質(zhì)我們也可靈活利用色譜條件。

   波長的選擇: 經(jīng)過二級陣列管檢測器全波段掃描可知:雙酚A在200nm至400nm波長范圍內(nèi)有三個zui大吸收峰,分別為200nm、224nm、280nm,由于考慮到流動相的影響,200nm在流動相甲醇的截至波長(210nm)內(nèi)因此不予考慮,而雙酚A在224nm處的響應(yīng)度比在280nm處的響應(yīng)度高,因此將*波長選定為224nm。

陰性和系統(tǒng)適用性試驗

  不加入樣品,加入試劑,按樣品處理方法進行測定,在組分相應(yīng)保留時間處沒有吸收;適當(dāng)?shù)母纳V條件中的流速、流動相比例、色譜柱品牌檢測,均能符合相應(yīng)的參數(shù)條件;其中取標(biāo)樣10μl進樣檢測,雙酚A的理論板數(shù)大于7000。

 精密度和重現(xiàn)性實驗

  取雙酚A標(biāo)準(zhǔn)供試液,進樣6針,每次10ul,進行測定,考察該組分精密度及重現(xiàn)性的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差,精密度相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.49%,重現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.095%。

線性關(guān)系和檢測限

  在本方法確定的色譜條件下,雙酚A濃度為0.1008ug/ml-1008.2ug/ml范圍內(nèi),線性關(guān)系良好,其峰面積-濃度的線性方程為:y = 10.537x+14.293,相關(guān)系數(shù)R2=0.9999;在 S/N =3的條件下,本方法zui低檢測限為0.038mg/kg。

 回收率試驗

  采用在實際樣品中加入不同添加水平的雙酚A標(biāo)準(zhǔn)溶液的方式進行回收率實驗,按前處理方法處理后分析,采用外標(biāo)法定量,每個添加水平單獨測3次,實驗結(jié)果表明,其平均回收率為85.78%~98.12%,RSD為397%~6.63%。

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